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O vírus da Hepatite A (HAV), principal causador da hepatite infecciosa em humanos, apresenta desafios para sua detecção primária em amostras clínicas e biológicas. O cultivo celular, método tradicional de isolamento viral, não é eficiente para o HAV selvagem, que possui crescimento lento e não causa efeito citopático detectável em células infectadas.
Diante dessa dificuldade, a técnica de RT-PCR (Reação em Cadeia da Polimerase com Transcrição Reversa) surge como uma poderosa ferramenta para a detecção do HAV. A RT-PCR permite a amplificação e detecção de sequências específicas do RNA viral, mesmo em baixas concentrações.
O procedimento de RT-PCR descrito para a detecção do HAV em mariscos pode ser adaptado para amostras clínicas, que apresentam maior carga viral e menor interferência de materiais estranhos. Além disso, a síntese e utilização de um RNA molde competidor possibilitam a quantificação das moléculas de RNA genômico do HAV presentes na amostra.
É importante ressaltar que o método de RT-PCR não fornece informações sobre a carga viral infecciosa, mas sim sobre o número de moléculas de RNA com a sequência específica do HAV. No entanto, essa informação é valiosa para o diagnóstico e monitoramento da infecção, auxiliando na tomada de decisões clínicas e na implementação de medidas de controle.
A RT-PCR representa um avanço significativo no diagnóstico da hepatite A, superando as limitações do cultivo celular e permitindo a detecção precoce e precisa do vírus. A aplicação dessa técnica em amostras clínicas e ambientais contribui para o controle da doença e a proteção da saúde pública.
A pesquisa e o desenvolvimento de novas técnicas moleculares, como a RT-PCR, são essenciais para o enfrentamento de desafios na área da saúde. A detecção rápida e precisa de patógenos, como o HAV, permite a intervenção precoce e a prevenção da disseminação da doença, salvando vidas e promovendo o bem-estar da população.
